Okt3/4 Antikörperreagenz für die Immunhistochemie

【Produktname 】

IHC-Antikörper –  3./4. Okt

【 Verpackungsspezifikation 】

【Verwendungszweck 】

Nur für Forschungszwecke. Das Oct3/4-  Antikörperreagenz  ist für die qualitative Identifizierung von Oct3/4 durch Mikroskopie in Schnitten von FFPE-Gewebe unter Verwendung eines immunhistochemischen Nachweissystems vorgesehen .

【Prinzip 】_

POU5F1 (POU-Domäne, Klasse 5, Transkriptionsfaktor 1), auch bekannt als Octamer-bindender Transkriptionsfaktor-3 (Oct-3, Otf-3), Octamer-bindender Transkriptionsfaktor-4 (Oct-4, Otf-4) und Oct -3/4, Funktionen bei der Regulierung und Aufrechterhaltung der Pluripotenz in embryonalen Stamm- und Urkeimzellen. Fügen Sie den Primärantikörper hinzu , um das Antigen auf den Gewebeschnitten zu binden , und verwenden Sie dann den HRP-markierten Sekundärantikörper, der den Primärantikörper bindet, um den Sekundärantikörper - Primärantikörper - Antigen-Komplex zu bilden .   Wenn chromogene DAB-Lösung hinzugefügt wird, reagiert HRP mit dem Enzymsubstrat und erzeugt ein braunes, unlösliches Reaktionsprodukt, das indirekt auf die Existenz eines Antigens hinweist. 

【Hauptkomponenten 】

I Immunglobulin, Antikörperverdünnungsmittel

【Lagerung 】

18  Monate lang bei 2 bis 8 °C  lagern .

【Probenanforderungen 】

FFPE-Gewebe werden normalerweise mit einem Mikrotom in 3 bis 5 μm dünne Abschnitte geschnitten .  Diese Schnitte werden dann auf Glasobjektträger montiert, die mit einem Gewebekleber beschichtet sind.

【Protokoll 】

1.  Probenvorbereitung : Entparaffinieren Sie die Objektträger in Xylol Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ für  5 Minuten ; übertragen Sie die Objektträger einmal durch 100 %, 100 %, 95 % bzw. 75 %  ige Alkohole für jeweils 2 Minuten  . Spülen Sie die Objektträger 30 Sekunden lang mit entionisiertem Wasser.

2 . Blockierung : Blockieren Sie die endogene Peroxidase-Aktivität, indem Sie Schnitte 5 Minuten lang  in 3 %iger H ₂ O ₂  -Lösung  bei Raumtemperatur inkubieren , um die endogene Peroxidase-Aktivität zu blockieren. Spülen Sie die Objektträger 30 Sekunden lang mit entionisiertem Wasser.

3 . Antigen-Retrieval : Erhitzen Sie den EDTA-Antigen-Retrieval-Puffer auf 100 °C . Legen Sie die Objektträger dann in den gekochten Puffer und erhitzen Sie sie 15 bis 20 Minuten lang weiter. 30 Minuten lang auf natürliche Weise abkühlen lassen. Spülen Sie die Probe mit Waschpuffer.

4 . Primärantikörper-Inkubation: Lassen Sie die Objektträger abtropfen. Primärantikörper zum Gewebe hinzufügen und 30 Minuten bei Raumtemperatur  inkubieren . (Verwenden Sie Antikörperverdünnungsmittel oder PBS als Kontrolle) . Waschen Sie die Objektträger zweimal in PBST, jeweils 5 Minuten lang. Wenn der Primärantikörper konzentriert ist, verdünnen Sie ihn bitte gemäß den Angaben auf der Verpackung auf RTU (gebrauchsfertig) . 

5.  Sekundärantikörper : Lassen Sie die Objektträger abtropfen . Sekundärantikörper  zum Gewebe hinzufügen und 20 Minuten bei Raumtemperatur  inkubieren . Waschen Sie die Objektträger zweimal in PBST, jeweils 5 Minuten lang .

6. DAB : Die Objektträger entleeren. Fügen Sie dem Gewebe DAB  hinzu und inkubieren Sie es 5 Minuten lang bei Raumtemperatur. Objektträger mit entionisiertem Wasser abspülen.

7. Hämatoxylin-Färbung : Lassen Sie die Objektträger abtropfen. Hämatoxylin zum Gewebe hinzufügen und 5 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren . Objektträger mit Wasser abspülen. Verwenden Sie die Säurelösung zur Differenzierung . Objektträger mit Wasser abspülen.

8. Dehydrieren : Dehydrieren Sie die Objektträger 2 Minuten lang in 75-prozentigem , 95-prozentigem und 100-prozentigem  Alkohol . Trocknen Sie die Objektträger. Beflecktes Gewebe mit einem Deckglas mit Eindeckmedium abdecken. 

【Positive Lokalisierung 】

1.  Positive Lokalisierung :  Kern.

2.  Positive Kontrolle :  Seminom .

【Vorsichtsmaßnahmen 】

1.  Bitte lesen Sie die Anleitung sorgfältig durch und machen Sie sich vor der Verwendung mit allen Komponenten des Kits vertraut. Befolgen Sie die Anweisungen während des Betriebs genau.

2.  Verwenden Sie das Kit oder die Kit-Komponenten NICHT nach Gebrauch.

3.  Dieses Kit darf nur von geschultem Fachpersonal verwendet werden. Bitte tragen Sie beim Umgang mit den Reagenzien einen geeigneten Laborkittel und Einweghandschuhe.

4.  Vermeiden Sie den Kontakt von Haut, Augen und Schleimhäuten mit den Chemikalien.

5.  Pipettieren Sie NICHT mit dem Mund.

6.  Nicht verwendete Reagenzien, gebrauchte Kits und Abfälle müssen gemäß den örtlichen Vorschriften entsorgt werden.

【Hersteller 】_

Firmenname: Xiamen Talent Biomedical Technology Co., Ltd

Adresse: Nr. 3. und 4. Etage, Gebäude B10, Nr. 2068 Wengjiao Road West, BioMedical Park, Bezirk Haicang, Stadt Xiamen, 36100 China

Tel.: +86 592 6315755            

E-Mail : tlsw@talentbiomedical.com                

Website : www.talentbiomedical.com

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