iVision™ IHC-Erkennungssystem

Produktname

iVision ^TM Poly-HRP Ziege anti-Maus, Kaninchen IgG 

Verpackungsspezifikation

Verwendungszweck

Nur für Forschungszwecke. iVision ^TM Ziegen-Anti-Maus, Kaninchen-IgG, Peroxidase-konjugiert für den chromogenen Nachweis von Zielantigenen, die mit einem vom Benutzer bereitgestellten primären Antikörper auf menschlichem Gewebe reagiert haben. Es wird empfohlen, die Reagenzien nicht über Kits oder Chargennummern hinweg zu ersetzen. 

Leistungsmerkmale _ _ _ 

Die Nachweissysteme haben sich als empfindlich erwiesen und zeigen eine spezifische Bindung an den primären Antikörper mit minimaler bis keiner unspezifischen Bindung. iVision ^TM -Erkennungssysteme haben sich innerhalb eines einzelnen Laufs, zwischen Läufen und zwischen Chargen als reproduzierbar und konsistent erwiesen. Die Produkte wurden durch Echtzeittests als stabil für die angegebenen Zeiträume bestimmt. 

Prinzip _

Antigene in Geweben und Zellen werden in der Immunhistochemie (IHC) durch einen zweistufigen Prozess nachgewiesen: die Bindung eines primären Antikörpers und die anschließende Detektion dieser Bindung durch das iVision ^TM Detektionssystem. Die Gewebe werden geschnitten und auf einem Objektträger montiert. Der in der Maus produzierte Primärantikörper wird dann aufgetragen, um mit Zielantigenen zu reagieren, gefolgt von der Applikation von Poly-HRP Ziegen-Anti-Maus, Kaninchen-IgG, um mit Primärantikörpern zu reagieren, und schließlich einer Substrat/Chromogen-Lösung, wie DAB oder AEC, die wird durch Peroxidase in unlösliche Ablagerung umgewandelt. Das gesamte Verfahren erzeugt ein sichtbares Profil von Positionen von Antigenen in Gewebeschnitten oder in Zelltypen. 

Hauptbestandteile

Ziegen-Anti-Maus, Kaninchen-IgG, Peroxidase-konjugiert

Lagerung

18  Monate bei 2~8℃  lagern .

Beispielanforderungen

FFPE-Gewebe werden normalerweise mit einem Mikrotom in 3 bis 5 μm dünne Schnitte geschnitten .  Diese Schnitte werden dann auf Objektträger aus Glas montiert, die mit einem Gewebekleber beschichtet sind.

Protokoll

1.  Probenvorbereitung ：Entparaffinieren Sie die Objektträger in Xylol Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ für  5 Minuten ；Überführen Sie die Objektträger einmal durch 100 %, 100 %, 95 % , 75 %  Alkohol für jeweils 2 Minuten . Objektträger 30 Sekunden lang mit entionisiertem Wasser spülen.

2 . Blockierung : Blockieren Sie die endogene Peroxidase-Aktivität, indem Sie die Schnitte 5 Minuten lang in 3 % H ₂ O ₂  -Lösung  bei Raumtemperatur inkubieren, um  die endogene Peroxidase-Aktivität zu blockieren. Spülen Sie die Objektträger 30 Sekunden lang mit entionisiertem Wasser.

3 . Antigen-Retrieval : Erhitzen Sie den EDTA-Antigen-Retrieval-Puffer auf 100 °C . Legen Sie die Objektträger dann in den gekochten Puffer und erhitzen Sie sie weitere 15 ～20 min. 30 Minuten natürlich abkühlen. Spülen Sie die Probe mit Waschpuffer.

4 . Inkubation des primären Antikörpers: Objektträger entleeren. Geben Sie den primären Antikörper zum Gewebe und inkubieren Sie ihn 30 Minuten lang bei  Raumtemperatur . (Antikörper-Verdünnungsmittel oder PBS als Kontrolle verwenden) . Waschen Sie die Objektträger in PBST für 2 Mal, jeweils 5 Minuten. Wenn der primäre Antikörper konzentriert ist, verdünnen Sie ihn bitte gemäß den Angaben auf der Verpackung auf RTU (gebrauchsfertig) . 

5.  Sekundärer Antikörper  : Entleeren Sie die Objektträger. iVision ^TM  Poly-HRP Ziegen-Anti-Maus, Kaninchen-IgG- Sekundärantikörper zum Gewebe  geben und 20 Minuten bei Raumtemperatur  inkubieren . Waschen Sie die Objektträger zweimal in PBST, jeweils 5 Minuten lang .

6. DAB ：Entleeren Sie die Objektträger. DAB  in das Gewebe geben und 5 min bei Raumtemperatur inkubieren. Objektträger mit deionisiertem Wasser spülen.

7. Hämatoxylin-Färbung : Lassen Sie die Objektträger ab. Hämatoxylin zum Gewebe geben und 5 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren . Objektträger mit Wasser spülen. Verwenden Sie die Säurelösung zur Differenzierung . Objektträger mit Wasser spülen.

8. Dehydrieren : Dehydrieren Sie die Objektträger in 75 % , 95 % , 100 %  Alkohol für 2 Minuten .  Trocknen Sie die Objektträger. Decken Sie gefärbtes Gewebe mit einem Deckglas mit Eindeckmedium ab.

Erwartete Ergebnisse _ _ 

Die richtige Verwendung dieses Reagenzes führt zu einer intensiven, klaren Färbung an den Antigenstellen sowohl in der Probe als auch in der Positivkontrolle. Jegliche Abweichung von diesen erwarteten Ergebnissen sollte Benutzer dazu veranlassen, die Ergebnisse in Frage zu stellen und den technischen Kundendienst oder den örtlichen Händler um Unterstützung zu bitten.

Vorsichtsmaßnahmen

1.  Bitte lesen Sie die Anweisungen sorgfältig durch und machen Sie sich vor der Verwendung mit allen Komponenten des Kits vertraut. Befolgen Sie die Anweisungen während des Betriebs strikt.

2.  Verwenden Sie das Kit oder andere Komponenten des Kits NICHT danach.

3.  Dieses Kit darf nur von geschultem Fachpersonal verwendet werden. Bitte tragen Sie beim Umgang mit den Reagenzien einen geeigneten Laborkittel und Einweghandschuhe.

4.  Kontakt von Haut, Augen und Schleimhäuten mit den Chemikalien vermeiden.

5.  NICHT mit dem Mund pipettieren.

6.  Nicht verwendete Reagenzien, gebrauchte Kits und Abfälle müssen gemäß den örtlichen Vorschriften entsorgt werden.

Hersteller _

Firmenname: Xiamen Talent Biomedical Technology Co., Ltd

Adresse: Nr. 3. und 4. Etage, Gebäude B10, Nr. 2068 Wengjiao Road West, BioMedical Park, Bezirk Haicang, Stadt Xiamen, 36100 China

Tel: +86 592 6315755            

E-Mail : tlsw@talentbiomedical.com                

Website : www.talentbiomedical.com

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