P53-Antikörperreagenz für die Immunhistochemie

【Produktname 】

p53 - Antikörperreagenz – Primärantikörper

【Bestimmungsgemäße Verwendung 】

Nur für Forschungszwecke. Das p53-  Antikörperreagenz  ist zur qualitativen Identifizierung von p53  durch Mikroskopie in Schnitten von FFPE-Gewebe unter Verwendung eines immunhistochemischen Nachweissystems vorgesehen .

【Prinzip 】_

p53, auch als Tumorprotein 53 oder TP53 bekannt, ist ein Tumorsuppressor und Transkriptionsfaktor, der bei einer Reihe von Antikrebsaktivitäten fungiert, darunter DNA-Reparatur, Zellzyklusarrest und Apoptose als Reaktion auf DNA-Schäden oder andere Stressoren. Mutationen in p53 sind mit einer Reihe von bösartigen Tumoren verbunden, einschließlich denen der Brust, der Eierstöcke, der Blase, des Dickdarms, der Lunge und des Melanoms. Fügen Sie den Primärantikörper hinzu , um das Antigen auf Gewebeschnitten zu binden , und verwenden Sie dann HRP-markierten Sekundärantikörper, der den Primärantikörper bindet, um den Sekundärantikörper - Primärantikörper - Antigen-Komplex zu bilden .   Wenn die chromogene DAB-Lösung hinzugefügt wird, reagiert HRP mit dem Enzymsubstrat, um ein braunes unlösliches Reaktionsprodukt zu erzeugen, das indirekt auf das Vorhandensein von Antigen hinweist. 

【Hauptkomponenten 】

I Immunglobulin, Antikörperverdünner

【Speicher 】

18  Monate bei 2~8℃  lagern .

【Beispielanforderungen 】

FFPE-Gewebe werden normalerweise mit einem Mikrotom in 3 bis 5 μm dünne Schnitte geschnitten .  Diese Schnitte werden dann auf Objektträger aus Glas montiert, die mit einem Gewebekleber beschichtet sind.

【Protokoll 】

1.  Probenvorbereitung ：Entparaffinieren Sie die Objektträger in Xylol Ⅰ , Ⅱ , Ⅲ für  5 Minuten ；Überführen Sie die Objektträger einmal durch 100 %, 100 %, 95 % , 75 %  Alkohol für jeweils 2 Minuten . Objektträger 30 Sekunden lang mit entionisiertem Wasser spülen.

2 . Blockierung : Blockieren Sie die endogene Peroxidase-Aktivität, indem Sie die Schnitte 5 Minuten lang in 3 % H ₂ O ₂  -Lösung  bei Raumtemperatur inkubieren, um  die endogene Peroxidase-Aktivität zu blockieren. Spülen Sie die Objektträger 30 Sekunden lang mit entionisiertem Wasser.

3 . Antigen-Retrieval : Erhitzen Sie den EDTA-Antigen-Retrieval-Puffer auf 100 °C . Legen Sie die Objektträger dann in den gekochten Puffer und erhitzen Sie sie weitere 15 ～20 min. 30 Minuten natürlich abkühlen. Spülen Sie die Probe mit Waschpuffer.

4 . Inkubation des primären Antikörpers: Objektträger entleeren. Geben Sie den primären Antikörper zum Gewebe und inkubieren Sie ihn 30 Minuten lang bei  Raumtemperatur . (Antikörper-Verdünnungsmittel oder PBS als Kontrolle verwenden) . Waschen Sie die Objektträger in PBST für 2 Mal, jeweils 5 Minuten. Wenn der primäre Antikörper konzentriert ist, verdünnen Sie ihn bitte gemäß den Angaben auf der Verpackung auf RTU (gebrauchsfertig) . 

5.  Sekundärer Antikörper  : Entleeren Sie die Objektträger. Sekundärantikörper  zum Gewebe geben und 20 Minuten bei Raumtemperatur  inkubieren . Waschen Sie die Objektträger zweimal in PBST, jeweils 5 Minuten lang .

6. DAB ：Entleeren Sie die Objektträger. DAB  in das Gewebe geben und 5 min bei Raumtemperatur inkubieren. Objektträger mit deionisiertem Wasser spülen.

7. Hämatoxylin-Färbung : Lassen Sie die Objektträger ab. Hämatoxylin zum Gewebe geben und 5 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren . Objektträger mit Wasser spülen. Verwenden Sie die Säurelösung zur Differenzierung . Objektträger mit Wasser spülen.

8. Dehydrieren : Dehydrieren Sie die Objektträger in 75 % , 95 % , 100 %  Alkohol für 2 Minuten .  Trocknen Sie die Objektträger. Decken Sie gefärbtes Gewebe mit einem Deckglas mit Eindeckmedium ab.

【Positive Lokalisierung 】

1.  Positive Lokalisierung :  Zellkern .

2.  Positive Kontrolle :  Eierstockkrebs .

【Vorsichtsmaßnahmen 】

1.  Bitte lesen Sie die Anweisungen sorgfältig durch und machen Sie sich vor der Verwendung mit allen Komponenten des Kits vertraut. Befolgen Sie die Anweisungen während des Betriebs strikt.

2.  Verwenden Sie das Kit oder andere Komponenten des Kits NICHT danach.

3.  Dieses Kit darf nur von geschultem Fachpersonal verwendet werden. Bitte tragen Sie beim Umgang mit den Reagenzien einen geeigneten Laborkittel und Einweghandschuhe.

4.  Kontakt von Haut, Augen und Schleimhäuten mit den Chemikalien vermeiden.

5.  NICHT mit dem Mund pipettieren.

6.  Nicht verwendete Reagenzien, gebrauchte Kits und Abfälle müssen gemäß den örtlichen Vorschriften entsorgt werden.

【Hersteller 】_

Firmenname: Xiamen Talent Biomedical Technology Co., Ltd

Adresse: Nr. 3. und 4. Etage, Gebäude B10, Nr. 2068 Wengjiao Road West, BioMedical Park, Bezirk Haicang, Stadt Xiamen, 36100 China

Tel: +86 592 6315755            

E-Mail : tlsw@talentbiomedical.com                

Website : www.talentbiomedical.com

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